紫外可見分光光度計(jì)多組分析方法及使用方法

       紫外可見分光光度計(jì)-多組分分析法在一個(gè)波長(zhǎng)，一個(gè)溶液的總吸光度是等于各個(gè)成分的吸光度的總和。根據(jù)這點(diǎn)就可分析混合物的各個(gè)組分。如果有一種混合物，雖然是多組分，但組分吸收帶不相重迭。在某波長(zhǎng)一種組分的吸收很大，而其它組分在此波長(zhǎng)則無(wú)吸收。這樣就可在此波長(zhǎng)采用上述的標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行此組分的定量測(cè)定。

      如果一個(gè)多組分混合物，其吸收帶雖然相互重迭，但能遵守比耳定律，則可以采用解聯(lián)立議程式的辦法來(lái)進(jìn)行定量。如混合物中含有n個(gè)已知組分，則需在n個(gè)適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)進(jìn)行n次組分各自在n個(gè)波長(zhǎng)的摩爾吸光系數(shù)。波長(zhǎng)的選擇應(yīng)注意使一個(gè)組分的吸光系數(shù)比其它組分的吸光系數(shù)大，這樣才能得到較高的度。如果混合物中的幾個(gè)組分吸收帶相互重迭的并且不遵守比耳定律，便不能用解聯(lián)立方程式的辦法來(lái)解析。此時(shí)用分光光度法定量比較困難。Fry采用校正法把混合樣品中的五個(gè)組分配成不同的溶液，得到一系列校正曲線。在校正曲線的基礎(chǔ)上，解析得到了五組分的含量。但方法十分繁瑣，使用不便。如果混合物中含有未知吸收帶的組分就更困難了。


      此時(shí)先用化學(xué)法分離純化。但也可直接利用分光光度法來(lái)分析。Morton利用有雜質(zhì)存在吸收光譜形狀的改變計(jì)算混合物中含有雜質(zhì)時(shí)魚肝油的量。雖然利用分光光度法可以作多組分分析，但方法比較繁瑣。近年來(lái)，很多分光光度計(jì)設(shè)有多組分分析附件。借助于微處理機(jī)來(lái)分析計(jì)算混合物中多種組分的含量，十分簡(jiǎn)便、迅速、準(zhǔn)確。使得分光光度法在混合的定量分析中發(fā)揮更大的作用。同樣，也可用后面介紹的導(dǎo)數(shù)光譜法來(lái)定量。

      使用注意事項(xiàng)

（一）使用的吸收池必須潔凈，并注意配對(duì)使用。量瓶、移液吸管均應(yīng)校正、洗凈后使用。
（二）取吸收池時(shí)，手指應(yīng)拿毛玻璃面的兩側(cè)，裝盛樣品以池體的4/5為度，使用揮發(fā)性溶液時(shí)應(yīng)加蓋，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應(yīng)無(wú)溶劑殘留。吸收池放入樣品室時(shí)應(yīng)注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈，晾干防塵保存。
（三）測(cè)定時(shí)除另有規(guī)定外，應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對(duì)照，采用1cm石英吸收池，在規(guī)定的吸收峰±2nm以內(nèi)，測(cè)幾個(gè)點(diǎn)的吸收度或由儀器在規(guī)定的波長(zhǎng)附近自動(dòng)掃描測(cè)定，以核對(duì)供試品的吸收峰位置是否正確，并以吸收度zui大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)，除另有規(guī)定外吸收度zui大波長(zhǎng)應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的測(cè)定波長(zhǎng)±2nm以內(nèi)。
（四）供試品溶液濃度除各該品種已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之間為宜。
（五）供試品應(yīng)取2份，如為對(duì)照品比較法，對(duì)照品一般也應(yīng)取2份。平行操作，每份結(jié)果對(duì)平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以內(nèi)。
（六）選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測(cè)得的吸收度值會(huì)偏低，狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)，對(duì)于大部分被測(cè)品種，可以使用2nm縫寬。